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SEM扫描电镜5种常用的生物样品干燥方法介绍

日期:2024-07-29 11:24:17 浏览次数:59

扫描电镜在观察生物样品时,要求样品B须干燥,以避免在高真空环境中产生剧烈汽化,影响真空度、污染样品或破坏样品的微细结构。以下是五种常用的生物样品干燥方法介绍:

1. 自然干燥法

基本描述:
自然干燥法是指样品中的水分在大气中自然蒸发,或样品经脱水处理后脱水剂自然挥发而干燥的方法。这种方法适用于含水量较少、不易变形的样品,如干种子、果壳、某些干花粉、长期保存的昆虫针插标本等。

优缺点:

优点:简便易行,无需特殊设备,成本较低。

缺点:干燥速度较慢,且对于含水量较多的动植物组织、游离细胞等样品,自然干燥过程中表面张力可能导致样品变形。

台式扫描电镜ZEM15.jpg

2. 烘干干燥法

基本描述:
烘干干燥法是将样品置于烘干箱中,通过控制温度和时间来去除样品中的水分。一般温度控制在80℃以下,烘干程度以含水量在5%以下为好。

优缺点:

优点:干燥速度较快,适用于不易变形且耐热的样品,如淀粉粒、孢子粉等。

缺点:高温可能导致部分样品成分损失或变形,不适用于热敏性样品。

3. 临界点干燥法

基本描述:
临界点干燥法是利用物质在临界状态时,液体和气体的密度相等,气液界面完全消失,液体的表面张力系数为零的特性,使样品的液体完全汽化并以气体方式排掉,从而达到完全干燥的目的。这种方法需要特殊设备——临界点干燥仪。

优缺点:

优点:能较好地保存样品的微细结构,减少干燥引起的变形。

缺点:设备昂贵,操作复杂,且仍存在一定的变形风险(约5%)。

4. 冷冻干燥法

基本描述:
冷冻干燥法是将含水样品放入低温环境中冷冻,然后使用真空技术使样品中的水分直接由冰升华成水蒸气,从而达到干燥的目的。这种方法避免了水分在液态时表面张力对样品的损伤。

优缺点:

优点:无需脱水处理,减少了样品变形的风险;适用于含水量高、热敏性强的样品。

缺点:设备复杂,操作时间长,且易产生冰晶损伤(特别是在直接冷冻干燥时)。

5. 真空干燥法

基本描述:
真空干燥法是将经脱水的样品置于真空容器中进行干燥。常用的真空干燥法包括以叔丁醇为升华介质的叔丁醇干燥法等。这种方法结合了冷冻干燥和真空技术的优点,既保留了冷冻干燥法的优点,又避免了冷冻处理可能带来的损伤。

优缺点:

优点:干燥速度快,对样品损伤小,适用于多种生物样品。

缺点:需要特殊设备,且有机溶剂可能对样品成分有抽提作用。

总结

在选择生物样品干燥方法时,应根据样品的特性(如含水量、热敏性、微细结构等)、观察要求和设备条件来综合考虑。对于大多数生物样品而言,临界点干燥法和冷冻干燥法因其能较好地保存样品微细结构和减少变形风险而被广泛应用。然而,这两种方法也存在一定的局限性,如设备昂贵、操作复杂等。因此,在实际应用中应根据具体情况灵活选择。