SEM扫描电镜的样本如何准备
日期:2024-05-24 10:26:23 浏览次数:47
扫描电镜样本的准备是一个关键步骤,以下是一些基本步骤和要点:
样品要求:
样品应为固体,且无毒、无放射性、无污染、无磁、无水、成分稳定。
样品尺寸和形状应适应SEM扫描电镜的样品台。
清洁样品以避免在显微镜中观察到不相关的颗粒。
样品固定:
对于组织或细胞样品,需要使用适当的固定剂(如戊二醛)进行固定,可以通过浸泡或注射的方式进行。
固定后,通过逐渐用有机溶剂(如乙醇)替代水,然后将样品置于真空中,使水分蒸发。
干燥处理:
使用适当的干燥方法,如临界点干燥、冷冻干燥等,以去除样品中的水分。
导电处理:
由于扫描电镜的工作原理需要电子束与样品交互,因此样品B须具有导电性。对于非导电或导电性较差的样品,需要在观察前进行喷镀或溅射导电层(如金属或碳膜)处理。
常用的导电处理方法包括真空蒸发镀膜和离子溅射镀膜等。镀层厚度及均匀性对成像质量有重要影响,通常镀层厚度控制在1-10纳米较为合适。
样品制备:
块状样品:低倍率观察时,可以使用导电胶带固定;高倍率观察时,建议使用液体导电胶。
粉末样品:可以直接固定在导电胶带或液体导电胶上。如果是导电胶带,揭下来的剥离纸要倒着放,撒完样品后再用剥离纸干净的面压一下,以确保固定牢固。如果是液体导电胶,Z好使用水溶性的,不容易和样品发生反应,撒样品的时间点应控制在导电胶快干的时候,使样品达到半浸没状态。
截面样品:如果是硅片或玻璃,需要用到玻璃刀。用玻璃刀划的时候要让开观察的面,通常是在上面和下面各划一下,然后再掰。
安装:
使用导电性双面胶或导电胶将样品牢固地固定在SEM扫描电镜样品支架上。
将样品放入真空室中,并在扫描电镜内建立适当的真空环境。
其他注意事项:
在使用SEM扫描电镜之前,确保真空系统正常运行,并检查真空密封,避免漏气。
在开始观察之前,进行电子束对准,确保电子束正确定位于样品表面。
选择适当的工作距离和放大倍数,以获得所需的图像细节和清晰度。
避免震动和振动,以维持仪器的稳定性。
扫描电镜通常在洁净的环境中运行,避免灰尘和颗粒物进入仪器。
以上是SEM扫描电镜样本准备的基本步骤和要点,具体步骤可能因样品类型和实验要求而有所不同。在进行实验前,建议详细阅读实验手册和操作指南,并遵循实验室的安全规定。
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