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SEM扫描电镜的具体生物样品制备方法介绍

日期:2024-02-19 13:38:57 浏览次数:82

扫描电镜(SEM)生物样品制备方法主要包括以下几个步骤:

取样和固定:用无菌剪刀从目标位置剪下生物样品,通常选择大小为2mm直径左右的样品。然后,将样品放入含有2.5%戊二醛的离心管中,置于4℃冰箱中固定1.5小时。

冲洗:用磷酸缓冲溶液(pH=6.8)冲洗样品3次,每次10分钟。在冲洗过程中,使用注射器吸走上一步骤的冲洗液。

扫描电镜.jpg

脱水:分别用浓度为50%、70%、80%、90%的乙醇对样品进行脱水处理,每次10~15分钟。然后,用****的乙醇脱水3次,每次10~15分钟。

置换:将样品分别用****乙醇、乙酸异戊酯=1:1和纯乙酸异戊酯进行置换,每次15分钟。

干燥:使用CO2临界点干燥仪对样品进行干燥。

粘样:用导电胶布将样品观察面向上粘贴在扫描电镜铝板上,然后放入干燥器内。

喷金:使用B离子溅射镀膜仪在样品表面镀上一层1500nm厚度的Au膜。

进样和观察:将样品固定在扫描电子显微镜的进样室,调整好样品角度后,将进样室推入机器内。根据预设的电压和高度,开始抽真空,并使用SEM对样品进行拍照。

以上步骤完成后,就可以得到适用于SEM观察的生物样品。请注意,每一步操作都需要精确控制,以确保样品的完整性和观察的准确性。

此外,对于不同类型的生物样品和观察目标,可能需要对上述步骤进行适当的调整。例如,对于粉末样品,可以直接将其固定在导电胶带或液体导电胶上,注意控制样品的撒布时间和方式,以获得更好的观察效果。

总的来说,SEM扫描电镜的生物样品制备方法需要综合考虑样品的性质、观察目标和设备要求,以确保样品的制备质量和观察的准确性。