扫描电镜样本三个干燥方法以及优缺点的介绍

扫描电镜观察样品要求在高真空中进行。无论是水或脱水溶液，在高真空中都会产生剧烈地汽化，不仅影响真空度、污染样品，还会破坏样品的微细结构。因此，样品在用电镜观察之前要进行干燥。

来介绍三种干燥方法主要有：空气干燥法、临界点干燥法、冰冻干燥 。

一、空气干燥法

基本描述：将经过脱水的样品，让其暴露在空气中使脱水剂逐渐挥发干燥 ，也可直接(不脱水)放在干燥器中干燥。

常用方法

方法1：单固定或双固定→脱水→样品置于100％的脱水剂中→在空气中自然干燥；

方法2：固定→（组织导电处理）→浸泡在缓冲液与乙醚的1：1中5min→空气干燥；

方法3：单固定或双固定→乙醇脱水→浸没于六甲基二硅胺烷HMDS中二次每次15min→通风厨干燥1h

二、临界点干燥法(CPD: critical point dryer)

1.基本含义：临界点干燥法是利用物质在临界状态时，其表面张力等于零的特性，使样品的液体完全汽化，并以气体方式排掉，来达到完全干燥的目的。

2.基本概念：临界点：物质的气态和液态两相之间达到相同密度、成为均Y流体时的温度和压力的总称。此时的温度称为临界点温度，压力称为临 界点压力。

3.中间剂：把用来置换脱水剂而后又被干燥剂所置换的液体。

4.常用干燥剂

co2，F-13，F-23，F-116，N2O

5.常用中间剂：

中间剂：把用来置换脱水剂而后又被干燥剂所置换的液体。

试剂：醋酸（异）戊酯、丙酮

6.干燥过程：固定脱水→转入中间液→移至样品室→用液体CO2置换醋酸异戊酯 →CO2汽化排气→干燥

7.临界点干燥失败（不彻底）的原因：

(1) 脱水不彻底

(2) 醋酸异戊酯反流

(3) 样表粘有过多醋酸异戊酯

(4) 样品量过多

(5) 样品室温度高，注入CO2困难注入CO2量太少

(6) 样品室漏气

三.冰冻干燥

1.基本描述：将经过冷冻的样品置于高真空中，通过升华除去样品中的水分或脱水剂的过程.

2.含水样品直接冷冻干燥常规步骤： 取材→固定→冷冻保护处理→快速冷冻→升华（10-2乇）干燥→装台镀膜

3.样品脱水后的冷冻干燥基本描述：样品用乙醇或丙酮脱水后过渡到某些易挥发的有机溶剂中，然后连同这些溶剂一起冷冻并在真空中升华而达到干燥。

干燥方法优缺点：

空气干燥优点： 简便易行、节省时间

缺点：由于脱水剂挥发时表面张力的作用，组织块会产生收缩变形

临界点干燥优点： 较好地保存样品的微细结构；操作较方便， 快速2～3小时即可完成，常用

缺点：需要特殊仪器设备---临界点干燥仪。

含水样品直接冷冻干燥优点：无需脱水，不会使样品收缩，较早使用的方法

缺点：花费时间长，消耗液氮多，易产生冰晶损伤，未被广泛应用.

样品脱水后冷冻干燥优点： 可减少冰晶损伤，且干燥时间短

缺点：有机溶剂对样品成分有抽提作用，造成部分内含物丢失。